高效液相色谱仪的使用和维护保养

高效液相色谱仪也叫高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱等，它是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而米6体育发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。由于液相色谱分析技术涉及的样品种类繁多、样品组成及其浓度复杂，样品物理形态多变，对液相色谱仪的正常分析测定造成一些干扰因素，如果不注意仪器的维护和保养，会对日常的分析测定带采不便，所以需要对仪器的使用以及维护要做一些了解才能熟练掌握这种分析技术。高效液相色谱仪的操作过程：1.翻开HPLC工作站（包含计算机软件和色谱仪），衔接好活动相管道，衔接检测体系。2.对抽滤后的活动相进行超声脱气10-20分钟。3.过滤活动相，根据需求挑选不一样的滤膜。4进入HPLC操控界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5.有一段时刻没用，或许换了新的活动相，需求先冲刷泵和进样阀。冲刷泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲刷进样阀，需求在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲刷时速度不要超越10ml/min。6.调理流量，初度运用新的活动相，能够先试一下压力，流速越大，压力越大，通常不要超越2000。点击injure，选用适宜的流速，点击on，走基线，调查基线的状况。7.规划走样办法。点击file，选择select?users?and?methods，能够选择现有的各种走样办法。若需树立一个新的办法，点击new?method。选择需求的配件，包含进样阀，泵，检测器等，根据需求而不一样。选完后，点击protocol。一个完整的走样办法需求包含：a.进样前的稳流，通常2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject变换；d.走样时刻，随不一样的样品而不一样。8.进样和进样后操作。选定走样办法，点击start。进样，一切的样品均需过滤。办法走完后，点击postrun，可记载数据和做符号等。悉数样品走完后，再用上面的办法走一段基线，洗掉剩余物。9.关机时，先关计算机，再关液相色谱仪。高效液相色谱仪操作注意事项：1、液相色谱仪的流动相应采用色谱纯溶剂，以满足要求、避免损坏色谱柱2、待分析的样品必须彻底溶解澄清、过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱;3、液相色谱仪流动相需经过滤、除气后方可使用;4、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内;5、液相色谱仪分析完成后，须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池。