威正翔禹生物科普：关于胎牛血清知识问答（三）

胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后，发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后，通过一系列工艺处理最终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子，一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。那么，面对如此珍贵的胎牛血清，实验人该如何防治黑点生成、如何储存使用血清呢？

1、细胞培养中如何防止黑点生成？

答：（1）尽可能地减少血清冻融次数。

（2）培养基无需37℃水浴。

（3）培养基保持最佳PH值7.0-7.2。

（4）严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。

（5）掌握细胞传代的最佳时机，细胞切勿生长过老。

2、如何储存使用血清？

答：储存条件：血清一般储存于－20℃，同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后，需要分装成小包装，储存于－20℃，使用前融化。关于血清融化，我们推荐以三步来进行（详细可参阅《关于胎牛血清知识问答（一）》）。例如，500ml的胎牛血清，首先在室温条件下放置90min，然后再20℃水浴放置25min，最后在37℃水浴放置35分钟即可。

使用浓度：自从有了合成培养基，血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用，使用浓度一般为5－20％，最常用是10％。过多血清容易使培养中的细胞发生变化，特别是一些二倍体的无限细胞系，迅速生长之后容易发生恶性转化。

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